技术分享：骨质疏松 (OP) 大鼠模型 —— 卵巢切除造模方案

骨质疏松OsteoporosisOP是以骨量下降、骨微结构退变、骨脆性升高、易发生脆性骨折为特征的全身性骨代谢疾病其中绝经后女性因卵巢功能衰退、内源雌激素断崖式下降破骨活性异常亢进、骨吸收远超骨形成是骨质疏松高发人群。受伦理、临床取样限制直接在人体开展病理机制与新药药效探究难以落地卵巢切除大鼠模型可精准模拟女性绝经后雌激素缺乏的生理病理变化是目前全球公认、被 FDA 推荐用于绝经后骨质疏松基础研究与药物筛选的经典体内模型。依托标准化造模方案构建合格动物模型是保障骨质疏松相关课题数据可靠、实验可重复的先决条件。原型物种人来源卵巢切除致骨质疏松模式动物品系SPF级Wistar大鼠健康6~8周雌性体重为180g-200g。实验分组实验分六组正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。实验周期6~8 weeks建模方法1 称量大鼠进行腹腔注射麻醉大鼠腹部正中剃毛后用碘酒及酒精擦拭手术区域。2 沿腹白线切开腹腔分离子宫并摘除卵巢清理伤口后分两层缝合皮肤及基层待大鼠清醒后将其放回洁净笼具后放回饲养室饲养定期观察大鼠状态及死亡情况并做好记录。3 术后3天每只大鼠每天注射40万单位青霉素防止感染。4 对照组仅摘除卵巢周围约1g脂肪而保留卵巢其余处理相同。5 术后6~8周处死取材取大鼠股骨、胫骨及血清。应用用于研究骨质疏松的发生过程以及药物干预和治疗的方案模型评价1.模型组大鼠血清睾酮水平明显下降雌二醇水平增高但无显著差异。2.生化检查结果示模型组大鼠骨形成指标大鼠血清血清碱性磷酸酶(alkaline phosphataseALP)抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphataseTRAP)活性均显著降低24 小时尿羟脯氨酸浓度、肌酐与尿钙、肌酐显著增高。Fig. TRAP staining of tbia in Control and model groupe rats组织病理学取各组大鼠胫骨标本固定 24-48h再经 脱钙隔5-7d 更换脱钙液脱钙完全后梯度乙醇脱水二甲苯透明纵向石蜡包埋5um 连续切片常规 HE 染色。对照胫骨骨小梁密集相互交织成网状模型组骨小梁数目明显减少骨小梁变薄呈断裂状。去卵巢大鼠是骨质疏松课题最常用的成熟体内模型但手术操作细节、动物饲养管控、样本前处理都会直接影响模型成功率与实验数据稳定性。云克隆Cloud-Clone拥有一站式动物模型科研服务平台可承接骨质疏松 OVX 大鼠造模、分组给药、样本取材、血清生化检测、病理切片染色全链条外包服务配套自研 ALP、TRAP、雌二醇等系列 ELISA 试剂盒实现从动物造模→样本检测→数据统计闭环服务助力科研人员高效完成骨质疏松相关课题研发。